解释:检测冠状病毒 (COVID-19) 的五个步骤
NIMHANS 神经病毒学系高级教授兼系主任 V Ravi 博士向《印度快报》解释了该过程。

NIMHANS 神经病毒学系高级教授兼系主任 V Ravi 博士解释了检测冠状病毒的过程 这个网站 .以下是五个步骤:
收集和运输
检测中心从鼻腔和喉咙后部(咽部)采集拭子,并将样本放入病毒转运培养基中,该培养基含有平衡盐和白蛋白,以防止病毒分解。然后样品在冷库中运输到测试实验室。
病毒RNA的提取
冠状病毒,例如 SARS-CoV(于 2002-03 年在中国出现)、MERS-CoV(于 2012 年在沙特阿拉伯出现),或当前导致 COVID-19 大流行的 SARS-CoV-2,具有很大的, 单链 RNA 基因组。测试实验室使用市售试剂盒(例如 QIAGEN 等公司生产的试剂盒)从样本中提取 RNA。
将 RNA 放入 PCR 混合物中
将提取的 RNA 添加到聚合酶链反应 (PCR) 混合物中。这包括“主混合物”,其中包含将 RNA 转化为 DNA 的“逆转录酶”。预混液包含 Taq 聚合酶,这种酶可以产生 DNA、核苷酸以及其他元素(如镁)的副本——放大 DNA 需要镁离子。
PCR 混合物还包含“试剂”,例如“引物”和“探针”。引物是特定的 DNA 链,旨在与要复制的 DNA 结合;探针用于检测 DNA 样品中的特定序列。世卫组织推荐了用于 COVID-19 检测的特定引物和探针。
最后,PCR 混合物包含一个看家基因——一种正常的人类基因 (RNase P),用于确保正确收集样本和提取 RNA。
病毒DNA的扩增
将 PCR 混合物中的样品放入管或板中,然后将其放入用于进行 PCR 过程的热循环仪中。
首先,RNA 被转化为 DNA。然后复制基因的过程开始。热循环仪加热和冷却与样品的混合物,在三个温度之间交替 - 熔化 DNA 以分离两条链,使引物与 DNA 结合,以及合成一条新链 - 所有这些都在一个持续一个周期内分钟。热循环仪运行 30-40 个这样的循环以扩增 DNA 以检查病毒。
对照控制测试
扩增的 DNA 与阳性对照(通常由克隆到质粒中的病毒基因组成)和阴性对照(即较早检测为阴性的“已知”样本)进行测试。
神经病毒学家 V Ravi 博士说,RNase P 应该显示扩增,阳性对照应该是阳性,阴性对照应该是阴性,然后无论你对样本得到什么结果,都是正确的结果。为了使测试在结果发布之前有效,必须满足某些“有效性标准”。
如果管家基因(RNase P)为阳性,阳性对照为阳性,阴性对照为阴性,且样品未显示任何PCR阳性结果,则宣布样品为SARS-CoV-2病毒RNA阴性。如果 PCR 结果为阳性,则患者患有 COVID-19。
和你的朋友分享: